基因过表达:检测基因表达的方法

目录

• 1.检测基因表达的方法
• 2.什么是基因表达
• 3.基因表达是什么意思
• 4.基因转录、翻译和基因表达的区别
• 5.“基因表达”、“基因差别表达”、“基因选择性表达”都是什么意思？
• 6.基因的过表达，和敲低都需要载体才能转到细胞里吗
• 7.基因选择性表达是什么，有何条件

1.检测基因表达的方法

主要用探针检测mRNA或用抗体检测出表达的蛋白质(转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测)一、外源基因转录水平的鉴定基因表达分为转录及翻译两阶段，转录是以DNA（基因）为模板生成mRNA的过程，翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程，检测外源基因的表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。所以基因表达检测分为两个水平。即转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测。转录水平上的检测主要方法是Northern杂交，它是以DNA或RNA为探针，检测RNA链。Northern杂交包括斑点杂交和印迹杂交。也可用RT-PCR（reverse transcribed PCR）方法检测外源DNA在植物体内的转录表达。其原理是以植物总RNA或mRNA为模板进行反转录，如果从细胞总RNA提取物中得到特异的cDNA扩增条带，则表明外源基因实现了转录。但对外源基因转录的最后决定，二、外源基因表达蛋白的检测表达蛋白的检测方法有三种：主要通过酶反应来检测；通过目的蛋白（抗原）与其抗体的特异性结合进行检测，具体方法有Western杂交、酶联免疫吸附法（ELISA）及免疫沉淀法；Western杂交是将聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳分离抗原（Antigen）固定在固体支持物上（如硝酸纤维素膜，不同分子量大小的蛋白质在凝胶中迁移率不同，蛋白质电泳后转到NC膜，以封闭非特异性位点，然后用含有放射性标记或酶标记的特定抗体杂交，扩展资料外显子与内含子表达过程中的相对性 从内含子与外显子的定义来看，除了tRNA基因和rRNA基因的外显子完全“几乎全部的结构基因的首尾两外显子都只有部分核苷酸顺序编码氨基酸，如人类G6PD基因的第一外显子核苷酸顺序。已发现一个基因的外显子可以是另一基因的内含子，淀粉酶基因包括4个外显子，肝生成的淀粉酶不保留外显子1。

2.什么是基因表达

基因表达（英语：Gene expression）是用基因中的信息来合成基因产物的过程。产物通常是蛋白质，但对于非蛋白质编码基因，如转运RNA（tRNA）和小核RNA（snRNA），产物则是RNA。所有已知生物都通过基因表达来生成生命所需的高分子物质。基因表达的过程可分为转录、RNA剪接、翻译、蛋白质的翻译后修饰这几步。基因表达调控控制细胞的结构与功能，同时也是细胞分化、形态发生及生物体的多功能性和适应性的基础。或是基因在细胞中的含量差异，皆可能使基因产生不同的表现。基因调节也可以作为进化变化的底物，因为基因表达的时间，位置和数量的控制可以对基因在细胞或多细胞生物体中的功能（作用）具有深远的影响。基因表达是基因型产生表现型（即可观察的性状）的最基本的层次。扩展资料转录机制转录过程由RNA聚合酶完成，以DNA（黑）作为模板，生成RNA（蓝）。上为编码链，下为模板链基因是编码了遗传信息的DNA片段。基因组DNA由反向平行、相反互补的双链组成，对于一个基因而言，这两条链可以分别称为模板链和编码链。以DNA为模板合成RNA副本的过程，转录发生在细胞核中，由RNA聚合酶完成。RNA聚合酶将核苷酸一个个拼接到RNA链上。新生成的RNA与DNA模板链的3'而模板链的3'

3.基因表达是什么意思

4.基因转录、翻译和基因表达的区别

是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。同一基因在不同组织能生成不同的基因产物来源于不同组织的类似蛋白，可以由同一基因编码产生，这种现象首先是由于基因中的增强子等有组织特异性，它能与不同组织中的组织特异因子结合，故在不同组织中同一基因会产生不同的转录物与转录后加工作用。指细胞分化过程中，奢侈基因按一定顺序表达，某些特定奢侈基因表达的结果生成一种类型的分化细胞，另一组奢侈基因表达的结果导致出现另一类型的分化细胞，这就是基因的差别表达。导致细胞的分化。3、 基因选择性表达：由于细胞分化发生于 生物体的整个生命进程中。

5.“基因表达”、“基因差别表达”、“基因选择性表达”都是什么意思？

1、 基因表达（gene expression）：是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。同一基因在不同组织能生成不同的基因产物来源于不同组织的类似蛋白，可以由同一基因编码产生，这种现象首先是由于基因中的增强子等有组织特异性，它能与不同组织中的组织特异因子结合，故在不同组织中同一基因会产生不同的转录物与转录后加工作用。2、 基因差别表达：指细胞分化过程中，奢侈基因按一定顺序表达，表达的基因数约占基因总数的5%～10%。也就是说，某些特定奢侈基因表达的结果生成一种类型的分化细胞，另一组奢侈基因表达的结果导致出现另一类型的分化细胞，这就是基因的差别表达。其本质是开放某些基因, 关闭某些基因，导致细胞的分化。3、 基因选择性表达：由于细胞分化发生于 生物体的整个生命进程中，所以基因的选择性表达在生命过程各阶段都在体现。不仅如此，基因的选择性表达在单细胞原核、真核生物生长发育中，甚至病毒的 生命活动中都明显表现，这充分体现了基因的选择性表达的普遍性。

6.基因的过表达，和敲低都需要载体才能转到细胞里吗

基因的表达是DNA-RNA-蛋白,期间有转录水平调控、转录后调控、翻译后调控等多种调控机制影响该基因的表达.所以蛋白水平高低的原因就可能是多方面的.蛋白表达多,也可能mRNA变化不大,

7.基因选择性表达是什么，有何条件

基因的选择性表达是指在细胞分化中，基因在特定的时间和空间条件下有选择表达的现象，基因的选择性表达的条件如下：生物体内有一套RNA监视系统，如果外来核酸是DNA（包括转基因、重组基因、DNA病毒、扩增子等），靶标RNA需要在细胞核中完全成转录后运转到细胞质中，而侵入细胞质的病毒RNA可以直接提供靶标RNA。基因沉寂需要经历不同的反应过程才能实现，包括组蛋白N端结构域的赖氨酸残基的去乙酰基化加工、甲基化修饰（由甲基转移酶催化。